तरल मोबाइल चरणों के उपयोग में दस सामान्य गलतियाँ!

गतिशील चरण रक्त के तरल चरण के बराबर है, और उपयोग के दौरान ध्यान देने योग्य विभिन्न बातें हैं। उनमें से, कुछ "नुकसान" हैं जिन पर ध्यान दिया जाना चाहिए।

01. कार्बनिक विलायक जोड़ने के बाद मोबाइल चरण का पीएच मापें

यदि आप कार्बनिक योजक के साथ पीएच मापते हैं, तो आपको जो पीएच मिलेगा वह कार्बनिक विलायक जोड़ने से पहले की तुलना में भिन्न होगा। हालाँकि, सबसे महत्वपूर्ण बात सुसंगत रहना है। यदि आप हमेशा कार्बनिक विलायक जोड़ने के बाद पीएच मापते हैं, तो अपने द्वारा उपयोग की जाने वाली विधि में अपने चरण बताना सुनिश्चित करें ताकि अन्य लोग भी उसी विधि का पालन करें। यह विधि 100% सटीक नहीं है, लेकिन कम से कम यह विधि को सुसंगत बनाए रखेगी। यह सटीक पीएच मान प्राप्त करने से अधिक महत्वपूर्ण हो सकता है।

02. कोई बफ़र उपयोग नहीं किया गया

बफर का उद्देश्य पीएच को नियंत्रित करना और इसे बदलने से रोकना है। कई अन्य विधियां मोबाइल चरण के पीएच को बदल देती हैं, जिससे अवधारण समय, चरम आकार और चरम प्रतिक्रिया में बदलाव हो सकता है।

फॉर्मिक एसिड, टीएफए, आदि बफर नहीं हैं

03. सामान्य पीएच सीमा के भीतर बफर का उपयोग नहीं करना

प्रत्येक बफ़र में 2 पीएच इकाई सीमा की चौड़ाई होती है, जिसके भीतर यह सर्वोत्तम पीएच स्थिरता प्रदान करता है। इस विंडो के बाहर के बफ़र पीएच परिवर्तनों के लिए प्रभावी प्रतिरोध प्रदान नहीं करेंगे। या तो सही रेंज में बफर का उपयोग करें, या ऐसा बफर चुनें जो आपके लिए आवश्यक पीएच रेंज को कवर करता हो।

04. जैविक घोल में बफर मिलाएं

किसी कार्बनिक चरण के साथ बफर समाधान मिलाने से बफर के अवक्षेपित होने की सबसे अधिक संभावना होगी। कई मामलों में, भले ही वर्षा हुई हो, फिर भी इसका पता लगाना मुश्किल होता है। हमेशा जलीय चरण में कार्बनिक घोल मिलाना याद रखें, जिससे बफर वर्षा की संभावना काफी कम हो सकती है।

05. एक पंप के साथ 0% से सांद्रता प्रवणता को मिलाएं

आज उपलब्ध पंप प्रभावी ढंग से मोबाइल चरणों और डीगैस इनलाइन को मिला सकते हैं, लेकिन आपकी विधि का उपयोग करने वाले हर किसी के पास उच्च गुणवत्ता वाला पंप नहीं होगा। ए और बी को एक ही घोल में मिलाएं और इसे 100% इनलाइन चलाएं।

उदाहरण के लिए, 950 मिलीलीटर जैविक आरंभिक मिश्रण को 50 मिलीलीटर पानी में मिलाकर तैयार किया जा सकता है। इसका लाभ यह है कि यह एचपीएलसी के बीच परिवर्तनशीलता को कम कर सकता है और सिस्टम में बुलबुले और वर्षा की संभावना को कम कर सकता है। यह ध्यान देने योग्य है कि पंप मिश्रण का अनुपात 95:5 है, जिसका मतलब यह नहीं है कि बोतल में पूर्व-मिश्रित अवधारण समय भी 95:5 है।

06. बफ़र बदलने के लिए सही संशोधित अम्ल (क्षार) का उपयोग न करना

केवल उस अम्ल या क्षार का उपयोग करें जो आपके द्वारा उपयोग किए जा रहे बफर नमक का निर्माण करता है। उदाहरण के लिए, सोडियम फॉस्फेट बफर केवल फॉस्फोरिक एसिड या सोडियम हाइड्रॉक्साइड के साथ तैयार किया जाना चाहिए।

07. विधि में बफर के बारे में सारी जानकारी न बताना, जैसे 5 ग्राम जोड़ना1000 मिलीलीटर पानी में सोडियम फॉस्फेट.

बफ़र का प्रकार पीएच रेंज निर्धारित करता है जिसे बफ़र किया जा सकता है। आवश्यक एकाग्रता बफर शक्ति निर्धारित करती है। 5 ग्राम या निर्जल सोडियम फॉस्फेट और 5 ग्राम मोनोसोडियम फॉस्फेट मोनोहाइड्रेट में अलग-अलग बफर ताकत होती है।

08. जाँच से पहले कार्बनिक विलायक मिलाना

यदि पिछली विधि में बेसलाइन बी के लिए बफर समाधान का उपयोग किया गया था, और आपकी विधि बेसलाइन बी के लिए कार्बनिक समाधान का उपयोग करती है, तो आप उम्मीद कर सकते हैं कि बफर को पंप टयूबिंग और पंप हेड में व्यवस्थित किया जा सकता है।

09. बोतल उठाएं और आखिरी बूंद खाली कर दें

इस बात की अच्छी संभावना है कि आपके पास पूरे रन को पूरा करने के लिए पर्याप्त मोबाइल चरण नहीं होगा और आपका नमूना धूम्रपान करेगा। पंप सिस्टम और कॉलम के जलने की संभावना के अलावा, मोबाइल चरण पूरी तरह से वाष्पित हो जाएगा और बोतल के शीर्ष पर मोबाइल चरण बदल जाएगा।

10. अल्ट्रासोनिक डीगैसिंग मोबाइल चरण का उपयोग करें

सबसे महत्वपूर्ण बिंदु यह सुनिश्चित करना है कि सभी बफर लवण घुल जाएं, लेकिन यह डीगैस का सबसे खराब तरीका है और इससे मोबाइल चरण जल्दी गर्म हो जाएगा, जिससे कार्बनिक घटक वाष्पित हो जाएंगे। बाद में अनावश्यक परेशानी से बचने के लिए, अपने मोबाइल चरण को वैक्यूम फ़िल्टर करने के लिए पांच मिनट का समय लें।